dc.contributor.author | Setti, Príncia Grejo | |
dc.date.accessioned | 2024-02-09T14:23:17Z | |
dc.date.available | 2024-02-09T14:23:17Z | |
dc.date.issued | 2023-03-17 | |
dc.identifier.citation | SETTI, Príncia Grejo. Produção de zebrafish ginogenético mitótico e meiótico: comparação do desenvolvimento da prole. 2023. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Ciências Biológicas) – Universidade Federal de São Carlos, São Carlos, 2023. Disponível em: https://repositorio.ufscar.br/handle/ufscar/19253. | * |
dc.identifier.uri | https://repositorio.ufscar.br/handle/ufscar/19253 | |
dc.description.abstract | The development of inbred animals, due to genetic homogeneity, represents an
important tool for biomedical research. To generate homozygous Zebrafish, it is
possible to disrupt the completion of meiosis II or mitosis in haploid embryos. To carry
out these interferences in the cell cycle, there are different methodologies based on
pressure shock, with varying degrees of complexity and success rates. To simplify and
improve the success rate, this work proposes to develop and test a new methodology,
with simpler procedures, based on the combination of sperm irradiation by UV-C for a
shorter time followed by a thermal shock at different temperatures. Thus, the
development of descendants generated by meiotic (Mei) or mitotic (Mit) gynogenesis,
through combinations of different irradiation parameters (28.5 mJ/cm2, 105 mJ/cm2
and 210 mJ/cm2) and temperatures (Mei: 40.40, 40.60 or 40.90°C; Mt: 41.40, 41.90 or
42.45°C), was compared. To confirm the success of gynogenesis, a compilation of
non-molecular methodologies was made, adding the use of embryonic metaphase
counts. The results showed that the irradiation of 28.5mJ/cm2 for a short period
guarantees haploid embryos and good fertilization rate. Regarding temperature, the
shock at 40.6°C applied from 4 minutes to 6 minutes post fertilization reached an
average of 42.08% of healthy animals at the end of 120 hours post fertilization. In
mitotic gynogenesis, 41.9°C showed an average of 11.91% of healthy larvae in 120
hours post fertilization when the shock was applied between 18 and 20minutes post
fertilization. Conclusion: the proposed methodology was effective in generating
gynogenetic embryos and meiotic gynogenesis generated offspring with higher
viability, malformation and health rates than the mitotic technique. Retention of the
second polar body requires lower temperature (~1.3°C) and is linked to the
developmental stage. Whereas, to interrupt a mitotic cycle, it was necessary to use a
higher temperature. | eng |
dc.description.sponsorship | Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) | por |
dc.description.sponsorship | Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) | por |
dc.language.iso | por | por |
dc.publisher | Universidade Federal de São Carlos | por |
dc.rights | Attribution-NoDerivs 3.0 Brazil | * |
dc.rights.uri | http://creativecommons.org/licenses/by-nd/3.0/br/ | * |
dc.subject | Ginogênese | por |
dc.subject | Homozigose | por |
dc.subject | Isogenia | por |
dc.subject | Zebrafish | por |
dc.subject | Danio rerio | por |
dc.title | Produção de zebrafish ginogenético mitótico e meiótico: comparação do desenvolvimento da prole | por |
dc.title.alternative | Mitotic and meiotic gynogenetic zebrafish production: comparison of offspring development | eng |
dc.type | TCC | por |
dc.contributor.advisor1 | Borra, Ricardo Carneiro | |
dc.contributor.advisor1Lattes | http://lattes.cnpq.br/5655362515357840 | por |
dc.description.resumo | O desenvolvimento de animais endogâmicos, em função da homogeneidade genética,
representa ferramenta importante para pesquisas biomédicas. Para gerar Zebrafish
homozigoto, é possível interromper a conclusão da meiose II ou mitose em embriões
haploides. Para realizar essas interferências no ciclo celular, existem diferentes
metodologias baseadas no choque de pressão, com grau de complexidade e taxas de
sucesso variáveis. Para simplificar e melhorar a taxa de sucesso, este trabalho propõe
desenvolver e testar uma nova metodologia, com procedimentos mais simples,
baseada na combinação de irradiação espermática por UV-C por um tempo mais curto
seguido de um choque térmico em diferentes temperaturas. Deste modo, o
desenvolvimento dos descendentes gerados por ginogênese meiótica (Mei) ou
mitótica (Mit), por meio das combinações de diferentes parâmetros de irradiação (28,5
mJ/cm2, 105 mJ/cm2 e 210 mJ/cm2) e temperaturas (Mei: 40,40, 40,60 ou 40,90°C;
Mt: 41,40, 41,90 ou 42,45°C), foi comparado. Para confirmar o sucesso da
ginogênese, foi feita uma compilação de metodologias não moleculares,
acrescentando o uso de contagens de metáfases embrionárias. Os resultados
mostraram que a irradiação de 28,5mJ/cm2 por curto período, garante embriões
haploides e boa taxa de fertilização. Em relação à temperatura, o choque a 40,6°C
aplicado dos 4 minutos aos 6 minutos pós fertilização, alcançou média de 42,08% de
animais saudáveis ao final de 120 horas pós fertilização. Na ginogênese mitótica,
41,9°C apresentou média de 11,91% de larvas saudáveis em 120 horas pós
fertilização quando aplicado o choque entre 18 a 20 minutos pós fertilização.
Conclusão: a metodologia proposta foi eficaz em gerar embriões ginogenéticos sendo
que ginogênese meiótica gerou descendentes com taxas de viabilidade, malformação
e saúde maior do que a técnica mitótica. A retenção do segundo corpúsculo polar
requer menor temperatura (~1,3°C) e está ligada ao estágio de desenvolvimento. Ao
passo que, para interromper um ciclo mitótico, foi necessário utilizar temperatura mais
alta. | por |
dc.publisher.initials | UFSCar | por |
dc.subject.cnpq | CIENCIAS BIOLOGICAS::GENETICA | por |
dc.description.sponsorshipId | FAPESP(processo: 2018/18910-6) | por |
dc.description.sponsorshipId | CNPq (processo: 425668/2018-5) | por |
dc.publisher.address | Câmpus São Carlos | por |
dc.contributor.authorlattes | http://lattes.cnpq.br/4636124789854528 | por |
dc.publisher.course | Ciências Biológicas - CB | por |
dc.contributor.authororcid | https://orcid.org/0000-0001-6773-3856 | por |
dc.contributor.advisor1orcid | https://orcid.org/0000-0003-3377-9295 | por |